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拉曼光谱技术在血脂异常诊断试验中的应用 [复制链接]

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血脂异常通常指由于脂质代谢紊乱而引起血清中血脂成分含量的异常变化,又称高脂血症。高脂血症促进脂质在血管内皮下沉积而形成斑块,晚期斑块破裂形成血栓,堵塞冠状动脉或脑血管造成心肌梗死或脑卒中,是心脑血管疾病的一个重要危险因素。目前,中国成人高脂血症患病率高达40.4%,随着人群血脂水平的升高,我国心血管病事件在—年预计增加万,所以提高血脂异常的早期检出率、控制血脂水平对减少心血管病事件的发生至关重要。

拉曼光谱基于分子振动产生,可以反映分子的结构和构象,从分子水平反映组织病理变化,是一种基于分子水平的检测手段。疾病的发生与分子蛋白质、脂类、核酸、糖等各种成分的改变相关,而光谱技术是了解这些物质变化最灵敏的技术。通过激光散射获得拉曼光谱图谱,根据波峰的位置、强度、谱线的宽度,可获得这些大分子物质的含量及结构信息。拉曼光谱技术可以探寻血清中与疾病相关的大分子物质的谱线特征,从分子水平研究与疾病相关的物质在血清中的浓度变化,从而进行疾病的诊断。

大多数高脂血症患者无任何症状和异常体征表现,常常是在进行血液生化检验时被发现,这并不利于血脂异常的早期发现,而且现有的诊断方法主要靠血常规检测,此方法虽然普及且简便,但仍然是一项有创的检查方法。拉曼光谱具有对样品破坏程度低、迅速、操作简便、专一性强等优点。可以作为一种无创、高效的血脂异常筛查方法用于疾病早期检查。

恶性肿瘤

恶性肿瘤目前已成为人类健康最大的威胁。由于缺乏高效的癌症筛查手段,以及对“早发现、早诊断、早治疗”等防癌策略认知不足,我国癌症患者5年生存率仅为30.9%。目前,检测肿瘤的3种主要方法为肿瘤标志物检测、影像学诊断和组织病理学诊断,其中组织病理学诊断是肿瘤诊断的“金标准”,但也是一种有创的诊断方式,不仅要求检测人员具有丰富的经验,而且诊断时效性差。

拉曼光谱可以在分子水平上揭示肿瘤组织与正常组织结构之间的差异,且不会改变样品的性状,故在肿瘤的良恶性判别、肿瘤的亚型分类、切片病理诊断等方面被广泛应用。肿瘤生物标记物检测是一种非侵入性的快速分析技术,而且肿瘤标记物浓度低,化学成分复杂,可以利用拉曼光谱技术检测血清肿瘤标志物成分,以弥补传统病理活检的局限性,完成癌症的早期筛查。

病毒检测

目前病毒感染的诊断方法有多种,主要为免疫检测、核酸检测、热成像检测等。其中核酸检测是在新型冠状病毒感染诊断中使用最多,也被世界公认的重要方法。有研究者在拉曼光谱仪的nm激光光源下检测健康人、乙型肝炎(以下简称乙肝)和丙型肝炎(以下简称丙肝)患者血清。与健康人血清相比,峰值在、、cm-1处,乙肝和丙肝患者血清光谱的峰值随着强度的降低而发生蓝移。研究发现乙肝患者血清中的、、、、、、、、cm-1波峰强度高于健康人血清。

乙肝和丙肝患者血清的拉曼光谱谱线波峰及波段与健康人血清光谱差异很大,该技术可被视为诊断乙肝和丙肝的有效工具。亦有研究表明,充分利用表面增强拉曼散射的“指纹图谱”分析优势,利用DNA探针将拉曼活性分子与靶核酸连接,通过对DNA探针上拉曼活性分子信号变化的检测和分析,可提高新型冠状病毒核酸检测的灵敏度与特异度。

血糖异常检测

糖尿病是一种影响全球4.22亿人的慢性非传染性疾病。目前最先进的血糖监测器也需要患者每天取数次指间血,这种方法不仅有创、不便,而且有感染风险。在不同光学技术中,拉曼光谱是用无创技术诊断疾病最有前景的光学方法之一。

有研究者使用拉曼光谱仪采集12名志愿者微血管血糖的拉曼光谱来预测血糖,结果显示激光聚焦甲襞微血管获得的拉曼光谱峰在、、、、、、、、、、cm-1处很明显,且比健康人血清谱峰要高,这些谱峰同样也存在于血液中。这表明可以使用无创的方法在体表进行临床范围可接受的血糖预测,对研究无创血糖检测具有重要意义,而且这种创新的方法还可以促进其他血液成分的非侵入性检测。

基于拉曼光谱技术对样品的定性及定量分析

定性和定量分析是拉曼光谱应用于物质分析科学中两个最重要的方面。不同分子物质有不同特征的拉曼光谱谱线,故可以用于物质分子定性与结构分析。光谱波峰的强度与分子物质浓度成正比,因此可用于物质的定量分析。

拉曼光谱分析法在临床上可用于对血红蛋白含氧量的检测。拉曼光谱分析法可以对样品进行快速、简单、可重复、无损伤的定性、定量分析,可以利用拉曼光谱这一特点,对血脂异常患者血清进行各血脂成分的定性及定量分析。

便携拉曼光谱仪的原理及应用

便携拉曼光谱仪工作原理与大型拉曼光谱仪的工作原理相似,先是由光谱仪激光器发出一束激光聚焦在被测物体上,然后用探头收集散射光,并滤去频率没有变化的散射光,再利用内置光栅对不同波长的散射光进行分离,最后对光谱进行收集和记录,并转换成数字信号后最终输出,得到拉曼光谱。

为了使用拉曼光谱对人体进行快速、简单、可重复、无损伤的定性、定量分析,在安全方面需要较低的激光功率来保证人体不受损害。目前除了布鲁克BRAVO,没有其他手持式拉曼光谱仪在所有工作模式下被归类为激光一级。因此,使用布鲁克BRAVO成了拉曼光谱测量人体的上上之选。

BRUKER手持式拉曼光谱仪——BRAVO:

激光安全等级1级、操作更安全;

SSE–连续移频激发(专利)、有效去除荧光;

DuoLASER双激发波长、扩展到C-H的测量区域;

IntelliTip-自动识别智能测试头、满足固体和液体样品;

内置式波数校正技术,确保波数的长期稳定性;

直观的、向导式触屏操作,与智能手机类似,可自动批量扫描报告;

BRUKER德国品质的稳定、精确的光学系统;

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